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全自動核酸純化儀在分子克隆技術中的應用

更新時間:2022-03-16瀏覽:1044次
  全自動核酸純化儀是應用配套的核酸提取試劑來自動完成樣本核酸的提取工作的儀器,核酸提取儀分為兩類:一類是大型的自動化的,一般稱為自動液體工作站;另一類是小型自動核酸提取儀,利用封裝好的配套試劑自動完成提取純化過程。
 
  大型自動液體工作站因為設備成本高昂,運行成本高,適合一次提取幾千個同一種類標本,所以得到應用的比較少;而小型自動化的儀器,因為儀器設備和運行成本低,操作方便得到越來越多的應用。
 
  核酸是生命的基本物質(zhì)之一,可分為DNA和RNA兩類,廣泛存在于動物、植物細胞、微生物等所有生命體內(nèi)。不僅起著儲存和傳遞遺傳信息的作用,而且在蛋白質(zhì)的生物合成上也占重要位置,因而在生長、遺傳、變異等一系列重大生命現(xiàn)象中起決定性的作用。
 
  核酸提取包括DNA提取,RNA提取,質(zhì)粒提取。核酸是遺傳信息的攜帶者,是基因表達的物質(zhì)基礎,是分子生物學研究的主要對象。無論是進行核酸的結構還是功能研究,首先都需要對核酸進行提取和純化。
 
  在分子克隆的所有操作中,基本的操作是核酸的純化。其關鍵步驟是去蛋白質(zhì),通常只要用酚/氯仿。氯仿抽提核酸的溶液即可。每當需要把克隆有某一些所用的酶滅活或去除以便進行下一步時,可進行這種抽提。
 
  然而,如要從細胞裂解液等復雜的分子混合物中純化核酸,則要先用某些蛋白水解酶消化大部分蛋白質(zhì)后,再用有機溶劑抽提。這些蛋白酶包括鏈霉蛋白酶及蛋白酶K等,它們對多種天然蛋白均有活性,用酚氯仿抽提:這兩種有機溶劑合用,比單獨用酚抽提的除蛋白效果更佳。繼而用氯仿抽提則可除去核酸制品中的痕量酚。當然,你也可以使用全自動核酸純化儀來簡化你的工作。

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